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離心機(jī)的沉降是直接跟離心力掛鉤的，離心力又跟離心法以及轉(zhuǎn)速有關(guān)，離心機(jī)沉降場(chǎng)流分級(jí)的應(yīng)用順序化可以大大延伸在一次實(shí)驗(yàn)中分子量的分離范圍。實(shí)現(xiàn)順序化有兩個(gè)途徑：逐漸改變離心機(jī)的轉(zhuǎn)速或改變載體的密度。經(jīng)常在水中增加蔗糖的濃度。開始時(shí)使用很強(qiáng)的場(chǎng)以分離分子量小的樣品，然后逐步降低轉(zhuǎn)速或*停止旋轉(zhuǎn)來促使大分子量的樣品從柱槽中淋出，使用這種順序勝利地分離了不同尺寸的聚苯乙烯顆粒膠乳，這相當(dāng)于分子量相差1000倍。

速率區(qū)帶離心法是在離心前于離心管內(nèi)先裝入密度梯度介質(zhì)（如蔗糖、甘油、KBr、CsCl等），待分離的樣品鋪在梯度液的頂部、離心管底部或梯度層中間，同梯度液一起離心。離心后在近旋轉(zhuǎn)軸處（X1）的介質(zhì)密度小，離旋轉(zhuǎn)軸遠(yuǎn)處（X2）介質(zhì)的密度大，但大介質(zhì)密度必須小于樣品中粒子的小密度，即ρP＞ρm。這種方法是根據(jù)分離的粒子在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的粒子處于不同的密度梯度層內(nèi)分成一系列區(qū)帶，達(dá)到彼此分離的目的。梯度液在離心過程中以及離心完畢后，取樣時(shí)起著支持介質(zhì)和穩(wěn)定劑的作用，避免因機(jī)械振動(dòng)而引起已分層的粒子再混合。由于ρP＞ρm可知S＞0，因此該離心法的離心時(shí)間要嚴(yán)格控制，既有足夠的時(shí)間使各種粒子在介質(zhì)梯度中形成區(qū)帶，又要控制在任一粒子達(dá)到沉淀前。如果DT5-2低速臺(tái)式自動(dòng)平衡離心機(jī)的離心時(shí)間過長，所有的樣品可全部到達(dá)離心管底部；離心時(shí)間不足，樣品還沒有分離。由于此法是一種不*的沉降，沉降受物質(zhì)本身大小的影響較大，一般是應(yīng)用在物質(zhì)大小相異而密度相同的情況。常用的梯度液有Ficoll、Percoll及蔗糖。

離心機(jī)轉(zhuǎn)速與離心力的換算：( 離心機(jī)分離因素計(jì)算公式 )

1、分離因素的含義：

在同一萃取體系內(nèi)兩種溶質(zhì)在同樣條件下分配系數(shù)的比值。 分離因素愈大（或愈?。?，說明兩種溶質(zhì)分離效果愈好，分離因素等于1，這兩種溶質(zhì)就分不開了。離心機(jī)上的分離因素則指的是相對(duì)離心力。

2、影響分離因素的主要因素：

離心力作為真實(shí)的力根本就不存在，在非慣性系中為計(jì)算方便假想的一個(gè)力。請(qǐng)看下面的說明： 向心力使物體受到指向一個(gè)中心點(diǎn)的吸引、或推斥或任何傾向于該點(diǎn)的作用。 笛卡兒把離心力解釋為物體保持其“限定量”的一種趨勢(shì)。 它們的區(qū)別就是，向心力是慣性參考系下的，而離心力是非慣性系中的力。我們處理物理題時(shí)都是在慣性系下（此時(shí)牛頓定律才成立），所以一般不用離心力這個(gè)概念。 由于根本不是一個(gè)情況下的概念，我們無法對(duì)他們的方向和大小進(jìn)行比較。